Waar moeten de (nieuwe) Lyme patiënten of chronische Lyme patiënten of andere (zoekende, hoopvolle of wanhopige) zieke mensen goed op letten?
De zogenoemde DualDur-test dark-field microscopy van Lyme Diagnostics Ltd. (Hongarije).
Stand van zaken - European Patent Office (EPO) - EP3947745 - 'Direct detection method for Tick-Borne Infections and a cell technology medium for the method'; Bron https://register.epo.org/application?nu ... n&tab=main en; Bron https://register.epo.org/application?nu ... ab=doclist
Stand van zaken 19 mei 2025: - European Patent Office (EPO); Bron https://www.epo.org/
Het is wachten op de reactie van de Onderzoekscommissie van het European Patent Office (EPO) op de antwoorden van 19 mei 2025; Bron https://register.epo.org/application?nu ... ab=doclist van de gemachtigde (advocaat octrooirecht; SBGK Patent Attorneys) namens Lyme Diagnostics Ltd. (Hongarije)...19.05.2025: Reply to communication from the Examining Division..
..19.05.2025: Amended description with annotations..
..19.05.2025: Description..
Stand van zaken - European Patent Office (EPO) - EP4091010 - 'Microscope for high-resolution and specific analysis of biological substances, and method of analysis'; Bron https://register.epo.org/application?number=EP20758316 en; Bron https://register.epo.org/application?nu ... ab=doclist
Stand van zaken 19 maart 2025: - European Patent Office (EPO); Bron https://www.epo.org/
..19.03.2025: New entry: Reply to examination report..
Claims dossier EP4091010; Bron https://worldwide.espacenet.com/patent/ ... =EP4091010 en Claims dossier EP3947745; Bron https://worldwide.espacenet.com/patent/ ... =EP3947745
..CLAIMS
1. A microscope for high-resolution and specific analysis of biological substances, wherein a power supply unit capable of generating constant current is attached to the micro- scope housing; provided with a set of mirrors and illuminating optics (4); a collimator (2) placed between a monochromatic light source (1) emitting light in a very narrow range of wavelengths and the collector lens (3); a dark-field condenser (5) and objective (7) including an in-between space to accommodate the stained biological specimen (6); and a surveillance camera (9) or eyepiece (10), and a removable color filter (8) placed between the objective (7) and the surveillance camera (9) or the eyepiece (10).
2. Microscope according to claim 1, wherein the monochromatic light source (1) is a blue LED, preferably 450 nm, with a maximum current draw of 3000 milliamperes, set at a luminous power of 900 - 1500 lumens.
3. Microscope according to claim 1 or 2, wherein the collector lens (3) is the original collector lens of the lamphouse of a dark-field microscope.
4. Microscope according to any of claims 1-3, wherein the LED light source used as a monochromatic light source (1) is attached to a heat sink preferably having a minimum sur- face of approximately 35 cm 2 .
5. Microscope according to any of claims 1-4, wherein the collimator (2) is preferably a tube with dull white internal surface and an internal diameter matching that of the original collector lens (3) used in the lamp and its length is equal to the focal length of the collector lens (3).
6. A method for the analysis of biological specimens with fluorescent staining, wherein the biological contents of the specimen are analyzed in a growing medium in liquid state after the addition of antibodies marked with fluorescent stain, using the microscope according to claims 1-5.
7. A method according to claim 6, wherein the analysis is performed on a specimen in DualDur cell culture medium or in any other growing medium of low conductivity..
Lees en leer meer: ter verificatie:
beelden/opnames met de donkerveld microscoop van de Borrelia spiroche(e)t(en) zie vanaf 0.27 minuten en zie vanaf 25.58 minuten in de uitzending van 12 september 2024 van Focus Tegen de Teek...De NTR-focus aflevering over het TICK ME onderzoek is hier terug te kijken; Bron https://ntr.nl/Focus/287/detail/Tegen-d ... ON_1353482 Meer informatie over het onderzoek is te vinden op de Amsterdam UMC Multidisciplinair Lymeziekte Centrum (AMLC) website; Bron https://www.amsterdamumc.nl/nl/lyme/ond ... ziekte.htm of door contact op te nemen via tickme@amsterdamumc.nl..
Ter verificatie:
beelden/opnames met de donkerveld microscoop van de Borrelia spiroche(e)t(en) zie blz. 22 in het boekje Actuele paperback Lymeziekte 2021; Bron https://www.biomaatschappij.nl/product/lymeziekte/ en er is een gratis pdf van het boekje; Bron https://www.biomaatschappij.nl/wp-conte ... DF-DEF.pdf En een goede en duidelijke uitleg
waarom de methode niet kan worden gebruikt voor diagnostiek van de ziekte van Lyme zie vanaf blz 79: ..Bij Borrelia doen zich meteen al een paar problemen voor. De bacterie is niet aanwezig in makkelijk verkrijgbare lichaams-vloeistoffen: voor kweek moet een stukje huid, wat gewrichtsvocht of hersenvloeistof worden gebruikt.
Het tweede probleem is dat Borrelia niet graag als kolonie op een plaat groeit. Het liefst vermenigvuldigt Borrelia zich in een speciaal vloeibaar kweekmedium, en zelfs daarin groeit hij slechts langzaam. Als je Borrelia vanuit huid probeert op te kweken, kan het tot wel acht weken duren voordat de kweek positief wordt. Dat is zó lang dat de kweek niet de meest geschikte methode is om de diagnose lymeziekte op tijd te stellen.
Tot slot is de bacterie ook in het vloeibare kweekmedium niet met het blote oog zichtbaar. Alleen met een zogenaamde donkerveldmicroscoop zijn de bacteriën zichtbaar. Het is dus nodig om wekelijks een kleine hoeveelheid van het kweekmedium onder zo’n microscoop te bekijken om vast te stellen of er sprake is van een positieve kweek.
Al deze problemen zorgen ervoor dat een Borreliakweek in de praktijk (buiten het Amsterdam UMC) niet gebruikt wordt voor diagnostiek naar lymeziekte. Voor het doen van onderzoek naar lymeziekte is dit wel een belangrijke techniek, omdat het voor veel experimenten nodig is om met levende Borrelia-bacteriën te werken..
Ter verificatie:
In herinnering.. 23 april 2017: de Monitor - Ziekte van Lyme; Bron https://www.npostart.nl/de-monitor/23-0 ... KN_1689714
beelden/opnames met de donkerveld microscoop van de Borrelia spiroche(e)t(en) zie vanaf 18.53 minuten.Ter verificatie:
BMC Microbiology volume 23, Article number: 204 (2023)
Publicatie 1 augustus 2023Open access - 'Lyme borreliosis diagnosis: state of the art of improvements and innovations' by Mickaël Guérin, Marc Shawky, Ahed Zedan, Stéphane Octave, Bérangère Avalle, Irene Maffucci & Séverine Padiolleau-Lefèvre; Bron https://bmcmicrobiol.biomedcentral.com/ ... 23-02935-5
..Microscopic observation and xenodiagnosis
The clinical utility of direct microscopic observation of Bb is limited due to the low concentration of bacteria in body fluids. Indeed, Wormser et al. considered the number of 0.1 cultivable cell/mL of whole blood [149], even if such quantification can vary according to the authors [148, 157].
This low load means that the detection by light microscopy is not feasible in clinical practice, ruling out such an approach for routine diagnosis. Furthermore, the specificity of this approach is moderate, as artifacts can indeed be responsible for false positive interpretations, even by a trained biologist. For example, recently, Laane et al. carried out a study based on
Alternatively, the presence of an infection can be determined by xenodiagnosis. This method is based on the biting and feeding of an uninfected tick on the suspected infected patient. Then, the tick is used to check the presence of Bb by Polymerase Chain Reaction (PCR) assay. Trials have been performed in murine models or in Rhesus Macaques [160, 161]. In this last-mentioned trial, small numbers of intact spirochetes were recovered by xenodiagnosis from treated monkeys, also demonstrating that B. burgdorferi can withstand antibiotic treatment. Even if xenodiagnosis appears safe and generally well tolerated in humans [162], Bockenstedt and Radolf underlined a flawed result since xenodiagnosis works in inbred mice because spirochetes persist in the distal skin, but not in humans [163]..
Informatie Stichting Tekenbeetziekten - Diagnose; Bron https://www.tekenbeetziekten.nl/de-teek ... /diagnose/..De bacterie zichtbaar maken met donkerveld microscopie
Door gebruik van technieken zoals donkerveldverlichting kan een Borrelia spirocheet nét zichtbaar gemaakt worden onder een lichtmicroscoop, al blijft het erg op het randje van de mogelijkheden. Donkerveld microscopie is een erkende diagnosetechniek bij sommige andere spirocheetinfecties (o.a. syfilis, leptospirosis en relapse fever), in de derde wereld vaak als primaire methode en bij ons als alternatief in geval van twijfel. Voor Lyme diagnose wordt gebruik van deze techniek echter afgeraden.
De simpele apparatuur maakt de methode populair bij alternatieve genezers (‘levend bloed analyse’) en bij hobbyisten die daar o.a. op internet over publiceren. Een probleem is dat men vaak allerlei structuren identificeert als ‘Borrelia’ zonder dat daar degelijk bewijs voor is en meestal ook zonder controle (zijn de ‘Borrelia spirocheten’ bijvoorbeeld ook zichtbaar bij gezonde patiënten?). De beperkte resolutie van een lichtmicroscoop en de wisselende verschijningsvorm maken identificatie op het oog ook voor een ervaren laborant zeer moeilijk. Er is dus een aanvullende techniek nodig om te bevestigen dat het om Borrelia gaat; die bevestigingsmethode - bijvoorbeeld via fluorescerende antilichamen tegen Borrelia - is in de praktijk meestal ook niet 100% betrouwbaar.
In het artikel Detectie van borrelia door microscopie; Bron https://www.tekenbeetziekten.nl/wetensc ... r-belicht/ werd hierover geschreven door Niek Haak. De methode van de Noorse onderzoekers is vorig jaar nader onderzocht en het lijkt erop dat hun methode niet geschikt is om Lymepatiënten aan te wijzen. Een officiële publicatie hierover hebben we nog niet gezien dus we kunnen niet beoordelen hoe degelijk deze ‘contra-expertise’ is.
Hoewel we denken dat deze diagnosetechniek potentieel interessant is, moeten we het voorlopig afraden en dat geldt dus ook voor ‘levend bloed analyse’ bij verdenking op Lyme..